2、 实验

2.1、材料

2.1.1、表面活性剂和洗涤剂

本研究使用了七种表面活性剂和三种商用洗涤剂。 这七种表面活性剂是：LAS（用于JIS洗衣粉试验的直链烷基苯磺酸钠，WAKO Chemical Co.）、AS（用于生物化学的十二烷基硫酸钠，WAKO Chemical Co.）、AES（乙醇乙氧基硫酸盐，TAYCA Co.，EO:3）、AE8（乙醇乙氧基酯，EO:8，日本SHOKUBAI Co.）、AE12（乙醇乙氧基酯，EO:12，日本SHOKUBAI Co.）、LB （酒精EO/PO嵌段共聚物，EO:8，PO:3，朝日电器株式会社）和肥皂（用于洗衣的商业产品，标签脂肪酸钠纯度：99%以上） 。这些表面活性剂的纯度均基于产品文件或标签。三种商用洗涤剂被命名为Det-1、Det-2和Det-3。Det-1为粉末型洗涤剂，表面活性剂成分为AES、AE和K-皂。Det-2也是粉末型洗涤剂，但主要由NaSOAP和K-皂组成，含有微量AE Det-3是一种液体型洗涤剂，含有AE和脂肪酸乙醇胺作为表面活性剂。

2.1.2、试验用水

通过在1L蒸馏水中溶解26.1mg CaCl2＠2H2O、17.7mg MgSO4＠7H2O、1.1mg K2SO4和25mg NaHCO3制备标准试验水。该试验水作为CaCO3的水硬度为25ppm。为了测试水硬度成分对毒性试验的影响，制备了另一种仅含有CaCl2＠2H2O的试验水 红色。该试验水的水硬度为CaCO3，也为25 ppm。在本文中，前一试验水命名为“4-盐混合水”，后一试验水命名为“CaCl2水”。

2.2、水生毒性试验

2.2.1、野生稻

野生稻是在水族馆商店购买的，在毒性试验前，在100 L容量的容器中饲养7天以上，容器中充满4-盐混合水。水温保持在20℃，明暗频率保持在16小时/8小时的比例。喂食频率为每天一次。

毒性试验符合JIS K0102（1998）的要求 指南，其中规定了使用71种鱼类对工业废水进行水生毒性试验的方法。将5 L试验容器装满4-盐混合水和试验表面活性剂溶液。用小浸网捕获10条鱼，称重、测量并转移到5 L试验容器中。测量试验水的溶解氧和pH值 每天一次，在24、48、72和96小时后计算活的和死的个体数量。通过绘制96小时后的死亡率来确定半数致死浓度（LC50）。

2.2.2、大型水蚤

大型水蚤是在脱氯自来水中，水温为18-22℃，以小球藻（小球藻工业公司V12）为饲料培育而成，用最近24小时内出生的幼虫进行毒性试验。

毒性试验符合JIS K0229（1992），“测定化学品对水蚤移动抑制的试验方法” 。首先，将9.5 mL试验水和试验表面活性剂样品倒入20 mL容量玻璃试管中。然后使用巴斯德移液管将5种试验生物体转移到试管中，并将蒸馏水添加到10 mL标记线中。在每种条件下使用4个试管样品。通过固定化的图形绘制确定EC50 24小时后，与表面活性剂浓度相对应的反应速率。

2.2.3、哈塔家族

在稻谷中捕获足爪螨，并在实验室用脱氯自来水在18-22℃的水温下繁殖。使用四胺（Tetra Co.）作为饲料。选择0.5-0.8 mm的生物体，使用0.5 mm网眼和0.8 mm网眼进行毒性试验。

将50 mL试验水和试验表面活性剂样品倒入50 mL烧杯中。使用巴斯德吸管将10个试验生物体转移到烧杯中。每种情况下使用2个试验烧杯样品。24小时后，通过使用400 mm CCD显微镜观察内脏运动来计数活的和死的个体数量 放大倍数：LC50通过死亡率的图解法测定。

2.3、表面张力测量

EZ-Pi（基布朗公司）用于测量试验液体的表面张力。该仪器是一种自动表面张力计，采用威廉平衡法，带有铂丝探针。液体温度控制在20-22℃，测量前试验液体静置20分钟以上。每种条件下重复测量6次打开，并使用平均值。

本文将表面活性剂溶液在急性水生毒性（LC50或EC50）出现点的表面张力值命名为“γtox”。

2.4、泥浆土添加量的评价

通过在表面活性剂溶液中加入泥土，研究了吸附剂存在对表面活性剂溶液表面张力或水毒性的影响。一般土壤样品取自横滨国家公园。大学校园。样品通过1.0 mm筛孔，并在80℃下干燥2 h。使用玻璃管搅拌器将0.75 g土壤样品与10 mL表面活性剂溶液在玻璃管中混合。静置约30分钟后，测量表面张力并进行毒性试验。忽略了与大型水蚤一起倒出的微量标准水（<0.1 mL）。

表面活性剂的生物毒性以及水的硬度和吸附效应对于水生生物毒性的影响——摘要、导言

表面活性剂的生物毒性以及水的硬度和吸附效应对于水生生物毒性的影响——实验

表面活性剂的生物毒性以及水的硬度和吸附效应对于水生生物毒性的影响——结果和讨论

表面活性剂的生物毒性以及水的硬度和吸附效应对于水生生物毒性的影响——结论、致谢！