摘要

精子结合剂(BSP)蛋白质是牛精浆中的主要蛋白质，已知部分嵌入精子膜的外叶并与含胆碱的脂质结合存在于其中。这种插入对冷冻保存后的精液质量产生负面影响通过诱导精子的早期获能。表面特性假设BSP蛋白质通过张力测量来检查：BSP蛋白质具有高度的表面活性。这个表明BSP蛋白不仅可以通过相互作用到达被磷脂覆盖的界面两者之间也是由于它们自身的表面活性。BSP蛋白的插入精子的脂质域外叶是在仿生系统（如朗缪尔）上复制的单层。BSP蛋白的插入可以在含有胆碱脂质的可压缩流体域中进行。单层膜也用于研究BSP蛋白的复合由两个磷脂组装体：来自蛋黄或脂质体的低密度脂蛋白(LDL)来自卵磷脂。不考虑磷脂结构（脂蛋白或脂质体），BSP是阻碍改变膜的结构。只有BSP蛋白：磷脂酰胆碱的总体比例很重要。两种螯合剂的区别在于它们的表面特性：LDL有很强的与外层融合的趋势，而脂质体主要留在外层相同的时间尺度。

一、简介

精子蛋白结合剂(BSP)是一个已知的蛋白质家族在输卵管精子储存库的形成中发挥作用在精子获能中，这是受精必不可少的精子成熟步骤[1,2]。在牛精浆中，三个专业以10:1:1的比例[3]对BSP蛋白进行鉴定和分类根据Manjunath等人的命名法确定。[2]：BSP1[4]，BSP3[5]和BSP5[6,7]，分别。他们的表观质量BSP1和BSP3为15–16.5 kDa，BSP5为28–30 kDa[6,8]。这三种蛋白质由一个独特的N端结构域组成然后是两个纤连蛋白II型结构域。只有N端三种BSP蛋白的结构域差异很大[4-6]。每个纤连蛋白II型结构域包含一个磷酸胆碱结合站点[9-14]。最后那些对于生物的生物学作用是必不可少的BSP蛋白质。事实上，精子膜的外叶在射精过程中与含有BSP蛋白的精浆接触[2,15]。BSP蛋白快速结合含胆碱的磷脂，如磷脂酰胆碱和存在于精子膜上的鞘磷脂[9,12,16-19]和通过部分插入精子的外部来覆盖精子的表面精子质膜的小叶[1,13,20]。这是第一个形成输卵管精子储存的关键步骤水库和精子获能之后。BSP蛋白既可溶又可插入疏水膜的事实争论BSP蛋白质的两亲性特征。因此，该本研究的第一部分旨在通过进行张力测量来检验这一假设。

BSP蛋白诱导的早期获能[21,22]具有冷冻保存后对精液质量的负面影响失去抗寒性和抗冻性[12,17,23-25]。

因此，保护者的存在对于维持精子质量。蛋黄被广泛用于隔离BSP蛋白[17,26-32]。这种隔离是由于特定的和强大的外层磷脂酰胆碱之间的相互作用蛋黄中存在低密度脂蛋白(LDL)，以及BSP蛋白[9,12,33,34]。在某些情况下，精子的保护还假设对抗LDL的早期获能由富含LDL的极性脂质之间的交换产生磷脂和精子膜中的脂质减少和胆固醇由于外流[29]。其他磷脂，如大豆卵磷脂目前被用作磷脂的替代品蛋黄。然而，在这种情况下，之间可能的相互作用脂质体和膜是未知的。因此，第二部分本研究的目的是比较低密度脂蛋白和脂质体与脂质膜接触。为此，一空气-缓冲液界面的单层脂质用于模拟精子膜外叶的脂质结构域。这个方法被证明是有效的复制异质牛外叶脂质域的域精子膜[35]。最后一个由主要脂质成分，即鞘磷脂、胆固醇、1-palmitoyl-2-docosahexaenoyl-sn-glycero-3-phosphocholine(PC)和缩醛磷脂1-(1Z-octadecenyl)-2-docosahexaenoyl-snglycero-3-phosphocholine(P-PC)。在这个单层中，胆固醇和鞘磷脂将自身结构化为缩合结构域被PC和P-PC的液体混合物包围，温度为34°C。低密度脂蛋白和脂质体被引入单层下方的亚相在接近与生物膜相关的压力下[36]。添加剂和单层之间的相互作用是通过监测表面积的变化来检测。最后，该低密度脂蛋白和脂质体对BSP蛋白的螯合特性在相同的脂质模型外小叶上进行了比较。精子膜和在相同的条件下。

应用不同组装的磷脂酰胆碱对牛精浆蛋白的隔离——摘要、简介

应用不同组装的磷脂酰胆碱对牛精浆蛋白的隔离——材料与方法

应用不同组装的磷脂酰胆碱对牛精浆蛋白的隔离——结果与讨论

应用不同组装的磷脂酰胆碱对牛精浆蛋白的隔离——结论、致谢！